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              維生素即用型產品——解決您的“難”點

              發布時間: 2021-05-13

              相信開展過維生素檢測的小伙伴們,已經體驗到了微生物法檢測維生素的“難”了。試驗中總是出現諸多問題——活化菌株不成功,標準曲線異常,檢測結果回收率偏高或者偏低,重復性差等。為何此種方法如此難做,國標還將葉酸、B12、生物素、泛酸的微生物檢測方法作為首選方法和仲裁方法呢?


              微生物法根據菌株必須依賴特定維生素才能生長的原理,利用比濁法測定細菌繁殖程度或代謝產物,間接對該維生素進行定量測定。該方法特異性強,靈敏度高,也是國際上廣泛使用的方法。微生物法檢測的是具有生物活性可以被吸收利用的維生素總量,這是儀器分析方法很難做到的。


              “難”在哪里呢?是否有解決辦法呢?



              “難”點一:菌株活化、保存、定期轉種以及接種液制備



              鼠李糖乳桿菌ATCC7469、植物乳桿菌ATCC8014、萊士曼氏乳桿菌ATCC7830,這三株菌中當屬萊士曼氏乳桿菌最為嬌貴,常有活化失敗的案例發生。建議大家購買此菌后,第一次活化時需嚴格按照ATCC說明書上方法先接種于MRS肉湯中35℃,有氧培養48h,之后轉種血平板于35℃,厭氧培養48h,方可活化成功。此外,每次做微生物法檢測維生素試驗前,需提前用一周時間來活化儲備菌種,連續傳種2代~3代恢復細菌活力后,方可使用。接種液的制備因項目不同而處理方法不同,筆者不再贅述,只強調一點:方法中只給出大致菌液濃度范圍即“透光率60%~80%之間”,具體調成多少濃度,還需實驗者根據菌株狀態和試驗經驗進行制備。


              應對“難”點一的解決方案——使用凍干的定量菌球


              此產品真空包裝,菌濃度定量制備且符合國標要求,直接加入培養基中即可使用,既可保證菌株活性又可免去活菌、洗菌、調菌濃度等繁瑣操作,方便、簡單、準確!同時,我司還提供了標準菌株的來源說明,可存檔溯源。


              維生素即用型產品——解決您的“難”點




              “難”——標準溶液的配制



              目前標準中,要求標準品的純度需要≥99%。通常購買到的標準品純度都不夠,因此需要折算后進行稱量,具體算法為:


              維生素即用型產品——解決您的“難”點



              稱量后按照國標要求逐步稀釋,依次配制標準儲備液、中間液和工作液。配制時,需要注意——以下幾點:



              1

              標準品精確稱量,應使用足夠精度的天平進行標準品的稱量;


              2

              不同維生素種類使用不同的溶解液,溶解需充分搖勻,每次定容都需十分精準;


              3

              使用棕色容量瓶進行標準溶液的配制,應注意不同維生素種類的標準儲備液、中間液和工作液的保存條件及效期;


              4

              國標規定配制使用的水為二級水,所用的試劑比如NaOH、乙醇等為分析純或者更高級別。


              標準溶液的配制過程復雜、步驟較多、對操作人員的技術水平要求比較高,配制的準確與否會直接影響檢測結果的準確性,導致回收率偏高或者偏低的情況發生。


              應對“難”點二的解決方案——使用凍干的定量標準品


              我司推出凍干定量標準品,只需使用無菌水復溶,充分震蕩混勻,即可使用。一“鍵”操作即可免去大家進行標準品稱量、配制、稀釋、保存等復雜的工作。同時我司還提供了標準品來源說明,可溯源,請放心使用。


              維生素即用型產品——解決您的“難”點




              “難”點三——培養基的制備






              制備維生素測定培養基,三角瓶需專用,不可與配制其他培養基的三角瓶混用,否則易混入目標維生素的成分;



              培養基配制用水,必須使用GB/T6682規定的二級水;

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              維生素測定培養基中,含有很多不耐熱、易變性成分,高壓滅菌時需注意不可過度加熱。此外,滅菌后應及時將測定系列管從高壓鍋中拿出,放入冷水中快速降溫;



              操作繁瑣,耗時。需先將培養基分裝系列測試管,滅菌,再接種菌液,此操作過程繁瑣易污染,稍有不慎就會導致試驗失敗。



              應對“難”點三的解決方案——使用即用型培養基


              即用型培養基,已滅菌處理,加入菌球混勻后,直接分裝到系列試驗管中,只需“一步”即可完成接種操作,替代國標中培養基滅菌和接種菌液的“兩步”工作,解決上述“難”點的同時,大大節約時間,提高工作效率。



              “難”點四——容量瓶,試管,槍頭等試驗材料潔凈度



              維生素檢測過程所涉及的所有器皿,包括容量瓶,吸管,三角瓶,試管,試管塞等均需處理,方可使用。此外,建議每個項目器皿專用,不要混用,避免干擾。


              維生素即用型產品——解決您的“難”點


              應對“難”點四的解決方案——使用無菌試管


              維生素即用型產品,配套使用無菌試管,避免試管,試管塞清洗,酸泡,熱處理的麻煩,極大程度的去除維生素檢測的干擾因素,提高工作效率的同時,保證結果的準確性。


              維生素即用型產品——解決您的“難”點




              小結


              維生素即用型產品——可有效解決國標法檢測試驗過程中的所有“難”點!減少人員操作誤差,提升試驗結果的準確性,并可極大程度的提高檢測效率!



              維生素即用型產品——解決您的“難”點


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